ELISA test: mis on põhimõte?

ELISA test: mis on põhimõte?

Definitsioon: mis on ELISA test?

Lingitud ensüümi immunoabsorptsiooni testi meetod-inglise keeles Enzyme-Linked Immuno Assay-või ELISA test on immunoloogiline test, mis võimaldab tuvastada või analüüsida bioloogilises proovis olevaid molekule. Selle kavandasid ja arendasid välja kaks Rootsi teadlast, Peter Perlmann ja Eva Engvall Stockholmi ülikoolis 1971. aastal.

ELISA meetodil analüüsitud molekulid on üldiselt valgud. Ja proovitüüpide hulka kuuluvad vedelad bioloogilised materjalid -plasma, seerum, uriin, higistamis-, rakukultuurisööde või rekombinantne valk -valk, mille toodab rakk, mille geneetilist materjali on geneetilise rekombinatsiooni teel muudetud -lahuseks puhastatud.

ELISA testi kasutatakse peamiselt immunoloogias valkude, antikehade või antigeenide olemasolu tuvastamiseks ja / või mõõtmiseks proovis. See seroloogiline test tuvastab eelkõige antikehad, mida organism toodab viiruse saastumise tõttu.

Nakkushaiguste ELISA testi põhimõte

Antikehade kasutamine nakkushaiguste diagnoosimiseks kujutab endast spetsiifilist ja kiiret meetodit. ELISA meetod on immuun-ensümaatiline meetod, mis võimaldab bioloogilisest proovist visualiseerida reaktsioone antigeeni-elusorganismi poolt võõraks peetud keha-ja antikeha vahel, kasutades ensüümimarkeri poolt tekitatud värvireaktsiooni. üldiselt leeliseline fosfataas ja peroksidaas - eelnevalt antikeha külge kinnitatud. Värvireaktsioon kinnitab isoleeritud bakteri identifitseerimist või soovitud viiruse olemasolu ja värvi intensiivsus annab märku antigeenide või antikehade kogusest antud proovis.

Erinevad ELISA testid

ELISA testi on neli peamist tüüpi:

  • Otsene ELISAvõimaldab antikehi tuvastada või mõõta. See kasutab ainult primaarset antikeha;
  • ELISA kaudne, mis on kõige laialdasemalt kasutatav, võimaldab ka antikehi tuvastada või analüüsida. See kasutab sekundaarset antikeha, mis annab sellele parema tundlikkuse kui otsene ELISA;
  • ELISA konkurentsis, võimaldab antigeenide annustamist. Võlakirjade konkurentsi tõttu toodetud ensüümi ei kasutata;
  • ELISA "võileivas", võimaldab antigeenide annustamist. Seda tehnikat kasutatakse tavaliselt uuringutes.

ELISA testi kasutamine

ELISA testi kasutatakse järgmistel juhtudel:

  • Leida ja mõõta seroloogias antikehi nakkushaiguste diagnoosimiseks: viroloogia, parasitoloogia, bakterioloogia jne;
  • Väikeses kontsentratsioonis annusvalgud: teatud plasmavalkude (immunoglobuliin E (IgE), ferritiin, valguhormoonid jne) spetsiifilised annused, kasvaja markerid jne;
  • Annustage väikseid molekule: steroidhormoonid, kilpnäärmehormoonid, ravimid…

Kõige tavalisemad juhtumid: Covid-19, Dengue, HIV, Lyme, allergiad, rasedus

ELISA testi kasutatakse eelkõige paljude nakkushaiguste diagnoosimiseks:

Sugulisel teel levivad haigused

Sealhulgas hepatiit, süüfilis, klamüüdia ja HIV. Tervishoiuasutuste soovitatud see on peamine AIDSi sõeluuring: see näitab HIV-vastaste antikehade ja p24 antigeeni olemasolu kuus nädalat pärast nakatumist.

Piirkondlikud või endeemilised haigused

Kollapalavik, Marburgi viirushaigus (MVM), Ladengue, Lyme'i tõbi, Chikungunya, Rift Valley palavik, Ebola, Lassa palavik jne.

Covid-19

ELISA test võimaldab rohkem kui 2–3 nädalat pärast sümptomite ilmnemist tuvastada SARS-CoV-2 vastaste antikehade olemasolu vähem kui tunni jooksul.

Viiruslikud patogeenid, mis põhjustavad sünnieelseid infektsioone

Näiteks toksoplasmoos, punetised, tsütomegaloviirus, herpes simplex.

Muud juhtumid

Kuid ta on leidnud ka avastamisrakendusi:

  • Rasedused;
  • Autoimmuunhaigused;
  • Toiduallergeenid: immunoglobuliinide E (IgE) üldkoguse määramine aitab hinnata ja ravida allergiat;
  • Hormonaalsed häired;
  • Kasvaja markerid;
  • Taimsed viirused;
  • Ja paljud teised

Covid-19 testi usaldusväärsus

SARS-CoV-2 vastaste antikehade avastamise osana kinnitab 2020. aasta augustis Institut Pasteuri, CNRSi, Insermi ja Pariisi Ülikooli poolt läbi viidud pilootuuring ELISA testi usaldusväärsust: mõlemad ELISA testid kasutavad sihtmärkantigeenidena kogu SARS-CoV-2 N-valk (ELISA N) või viirusepiiri rakuväline domeen (S). See meetod võimaldaks tuvastada antikehi enam kui 90% juhtudest, kusjuures väga väike valepositiivne määr on 1%.

ELISA testi hind ja hüvitis

Analüüsilaborites retsepti alusel tehtud Elisa testid maksavad umbes 10 eurot ja ravikindlustus hüvitab need 100% ulatuses.

Tasuta teabe-, sõeluuringu- ja diagnostikakeskustes (CeGIDD) läbi viidud HIV-nakkuse ja SARS-CoV-2 korral võivad need olla tasuta.

Jäta vastus